Yale klinikinės virusologijos laboratorijos nariai peržiūri molekulinių testavimų rezultatus ir remiantis jais patikslina oficialias JAV Maisto ir vaistų administracijos (FDA) ir JAV Ligų kontrolės ir prevencijos centro (CDC) rekomendacijas PGR testams. Yale laboratorijos mokslininkai diagnozuoja gripą vietoje ir padeda CDC aptikti naujas viruso padermes. O kiekvieną vasarį ar kovą Pasaulio sveikatos organizacija parenka padermes, nuo kurių turėtų apsaugoti kita gripo vakcina. Užkrečiamųjų ligų specialistė Marie Louise Landry, medicinos mokslų daktarė, aptaria, kaip Yale klinikinės virusologijos laboratorija dirbdama su CDC, realiu laiku vysto su gripo virusu susijusius tyrimus.
Pavyzdžiui, dr. Landry dėka seilių pavydžiai buvo pavirtinti kaip tinkamas būdas tepinėliams paimti, kai taikomas PGR testavimo metodas. Taigi, “kištis pagalį” į nosies ir gerklės landas JAV nėra būtina, nes PGR koronaviruso tyrimams galima duoti ir savo seilių davinį.
Skaitant 2019 metų Yale Instituto straipsnį apie darbo užkulisius, dažnai kyls mintis, kad rašoma ne apie gripo virusą, o apie dabartinį Sars-Cov2 virusą, bei dabar naudojamą PGR tyrimą, dažnai duodantį klaidingai teigiamus rezulatus. Nieko tokio, jei protingesni žmonės, panašumų neįmatys.
Atkreipkite dėmesį, bus rašoma, kad „cirkuliuojantys virusai ne visada atitinka vakcinos prognozes”. Akivaidu, kuriamos vakcinos atsilieka nuo einamu laiku kažkur “afrikoje” vykstančių virusinių mutacijų. Nepamirškime, kad virusai Žemėje atsirado seniau nei išsivystė ląstelės, o naujausiais duomenimis manoma, kad virusai išmokė mūsų genus atpažinti ir virusų mutacijas.
Tai koks tada tikslas kurti molekulinius testavimo būdus, kad aptikti dar nematytų virusų atmainų RNR, tada visus iš eilės versti testuotis ir aptikus “tą RNR” – reikalauti pasaulio gyventojus švirkštis skubos tvarka “patvirtintus” medicininius preparatus (Covid19 vakcinas)?
Galima pažiūrėti kitu kampu, pavyzdžiui, jei viruso mutacijos yra sukuriamos laboratorijose. Tada jį paskleidžiame, testuojame savo pačių patvirtintais testais ir tada pardavinėjame nuo šio viruso “apsaugančias” vakcinas. Čia dar ne viskas. Dėmesio – “du zuikiai vienu šūviu” – juk jau nebe paslaptis, kad vakcinuoti asmenys platina virusus. Tai rodo JAV duomenys po Covid19 vakcinacijos ir pripažįsta Lietuvos Sveikatos Ministerija. Ar nepanašu, kad žmogaus sukurtas virusas, peršamas kaip natūraliai mutavusiu, tampa puikiu pretekstu įvedinėti nuolatinius karantinus ir sekti kiekvieną skiepyto užkrėstą asmenį?
Turime jau antrą koronaviruso pavasarį ir baigiame visai pamiršti gripą, todėl pažiūrėkime, ką įdomaus pasakojo Yale specialistai apie gripo viruso pandemijas ir molekuliniais gripo viruso testavimo metodus Jungtinėse Amerikos Valstijose, kaip tik priešišauštant pasaulinei Covid19 įsterijai 2020 kovą.
Gripo laboratorijos užkulisiai
Gripas turi daug bendro su žiema. Jo sunkumas kiekvienais metais skiriasi, tačiau blogiausias iš jų dažniausiai būna gruodžio, sausio ir vasario mėnesiais. Kiekvieno poveikis individui gali būti nuo lengvo iki nemalonaus, ir net iki gana pavojingo. Nors iš tikrųjų nėra galimybės iš anksto žinoti, koks bus sunkus gripo sezonas ar žiema, ekspertai bando numatyti, kaip padėti žmonėms išlikti saugiems.
Kalbant apie gripą, tai reiškia viso pasaulio gydytojų ir mokslininkų pastangas, įskaitant Yale medicinos ekspertus, kurie tiesiogiai bendradarbiauja su laboratorijų specialistais ir epidemiologais Ligų kontrolės ir prevencijos centre (CDC). Jie dirba realiuoju laiku tirdami su gripu susijusius pokyčius. Neseniai kalbėjomės su Yale medicinos virusologe ir infekcinių ligų specialiste bei Yale klinikinės virusologijos laboratorijos direktore Marie Louise Landry ir ką tai reiškia pacientams, bet, pirmiausia, apžvelkime, kodėl šis momentinis stebėjimas yra svarbu.
Pražiūrėtas kiaulių gripas
Kiekvieną vasarį ar kovą Pasaulio sveikatos organizacija parenka padermes, nuo kurių turėtų apsaugoti kita gripo vakcina, tada laukia ilgas vakcinos gaminimo laikas ir platinimas iki spalio mėnesio.
Tačiau cirkuliuojantys virusai ne visada atitinka vakcinos prognozes. “Mes tai vadiname neatitikimu”, – paaiškina dr. Landry. „Vienas dalykas, kurį žinome apie gripą, yra tas, kad nors ir bandome numatyti, ką virusas darys toliau, jis gali keistis ir mus pergudrauti“.
Prieš dešimt metų tai buvo ypač aktualu. 2009 m. amerikiečiai žiauriai sirgo gripo sezonu, tuomet atsirado nauja, pavojinga padermė, kurios dar nebuvo nustatyta nei gyvūnams, nei žmonėms. Ta 2009 m. H1N1 atmaina iš pradžių buvo vadinama „kiaulių gripu“, nes kilo tarp kiaulių. Buvo paskelbta pandemija, kadangi ta atmaina sirgo tiek daug žmonių visame pasaulyje. JAV buvo daugiau nei 60 milijonų kiaulių gripo atvejų, sukėlusių daugiau nei 12 000 mirčių – 80% jų sudarė jaunesni nei 65 metų žmonės. Įprastu gripo sezonu 70–90% mirčių yra vyresni nei 65 metų žmonės.
2009 m. pandeminio gripo atskyrimas nuo kitų padermių buvo kritinis, todėl buvo galima imtis tinkamų atsargumo priemonių jo plitimui stabdyti. Yale laboratorija buvo išskirtinai pasirengusi tokiai užduočiai atlikti. Kai tik buvo atpažinta nauja gripo atmaina, Yale klinikinės virusologijos laboratorijos specialistai galėjo ištirti tą specifinę gripo padermę padermę, ko negalėjo padaryti greiti tyrimai, siūlomi gydytojų kabinetuose ir daugumoje ligoninių. Taip yra todėl, kad „Yale New Haven“ ligoninės laboratorija yra viena iš nedaugelio šalies mastu aprūpintų specializuotomis technologijomis, įskaitant pažangias laboratorijos technikas ir instrumentus, kuriuos teikia pats JAV Ligų kontrolės ir prevencijos centras (CDC).
Toliau skaitykite pokalbį su Yale laboratorijos virusologe dr. Marie Landry apie molekulinio testavimo (PGR) įrangą, jos poveikį 2009 m., ir kodėl tai buvo svarbu 2019 metais.
Pirmiausia, kaip veikia gripo tyrimai? Kokie tyrimai paprastai atliekami, jei einu pas savo gydytoją?
Daugumoje JAV gydytojų kabinetų naudojamas vadinamasis greitasis gripo testas. Jau daug metų tai buvo vienintelis paprastas testas, kuris aptinka viruso dalelės baltymus ar „antigenus“. Paprastai tam nereikalinga sudėtinga įranga. Tiesiog nosies ar gerklės tamponėlis, įkištas į skystą buferį ir gerai išmaišytas. Tada skystis buvo uždedamas ant bandymo juostelės ar užtaiso. Po 10–15 minučių rezultatas nuskaitomas akimis – matomos spalvotos juostelės linijos.
Tai buvo didelis laimėjimas, nes toks testas tapo pirmą kartą prieinamas, tačiau norint gauti teigiamą rezultatą – reikdavo maždaug milijono viruso dalelių. Taigi, to negalima vadinti “jautrumu”. Įdomu tai, kad vaikų nosies kanaluose yra daugiau virusų nei suaugusiesiųjų, todėl šie greiti tyrimai vaikams tinka labiau, o suaugusiesiems dažniau gaunamas „klaidingai neigiamas“ rezultatas.
2018 m. JAV Maisto ir vaistų administracija (FDA) pradėjo vykdyti aukštesnius gripo testų jautrumo reikalavimus. Atliekant kai kuriuos bandymus, rezultatams nuskaityti naudojami nedideli prietaisai. Tačiau senas testas dėl paprastumo, greičio ir išlaidų vis dar naudojamas daugelyje klinikų ir gydytojų kabinetų.
Kaip skiriasi gripo tyrimai ligoninėse?
Per pastaruosius kelerius metus ligoninėse įvyko didelis pokytis, kadangi buvo pereita prie testavimo, kuriuo nustatoma gripo viruso genetinė medžiaga. Svarbiausia jautrumo išbandyme yra tai, kad prieš nustatymo etapą viruso genomas padauginamas iš biocheminės reakcijos milijoną – milijardą kartų. Todėl mėginyje gali būti nedidelis viruso kiekis, tačiau pats tyrimas jį pridaugina (sustiprina), todėl virusas yra aptinkamas. Tokio tipo tyrimai vadinami „molekuliniais tyrimais“, o pirmasis ir dažniausiai naudojamas tyrimas yra žinomas kaip „polimerazės grandinės reakcija (PGR)“ testavimas.
Iš pradžių molekuliniai tyrimai užtruko vieną ar dvi dienas ir reikalavo specializuotos patirties, kurios niekas neturi daugumoje ligoninių. Pastaraisiais metais atsirado paprastesnių, greitesnių molekulinio gripo testų versijų, tačiau jos yra daug brangesnės ir reikalauja brangesnių instrumentų bei paslaugų sutarčių. Tačiau ligoninės aplinkoje, kur infekcijos prevencija, t.y. siekiant išvengti perdavimo kitiems pacientams, yra labai svarbi, ir tai yra pats jautriausias testas.
Kodėl taip svarbu, kad gripo tyrimai būtų tikslūs ir atnaujinti?
Gripas yra unikalus tuo, kad gali keistis. Viruso pokyčiai leidžia išvengti mūsų imuninės gynybos, o atliekant diagnostinius tyrimus viruso nepastebėti. Atsiradus naujoms viruso padermėms, turime būti tikri, kad galime jas aptikti. CDC nuolat stebi cirkuliuojančias viruso padermes. Kiekvienais metais mes tikriname, ar yra kokių nors pakeitimų, kuriuos turime atlikti. Per metus, jei matome pokyčius, kaip veikia testas, pranešėme apie tai CDC.
Yale laboratorijai CDC naudojamas PGR testavimas gripui labiausiai pasitarnavo 2009 m., kai pasirodė naujas pandeminis gripas. Mums nedelsiant pavyko nustatyti naują tyrimą ir buvome vienintelė ligoninė valstijoje – ir viena iš nedaugelio šalyje, išskyrus visuomenės sveikatos laboratorijas – galinti nustatyti naują gripo viruso pandemijos padermę.
Kodėl Yale atlieka šį specializuotą gripo testą kartu su CDC?
Yale New Haven Ligoninėje yra atskira klinikinės virusologijos laboratorija, kuri ligoninės aplinkoje nėra įprasta. Diagnostinė virusologija labai anksti apėmė molekulių amplifikacijos metodus (PGR). Kadangi virusai gali būti sudėtingi, pavojingi ar tiesiog labai lėtai augantys kultūroje, buvome labai motyvuoti ir sukaupę kompetenciją, kad galėtume pasiūlyti visų paplitusių virusų, įskaitant gripą, PGR jau prieš 15–20 metų. Kai 2008 m. gruodžio mėn. CDC mums pateikė patobulintą gripo testą, mes jį nedelsdami patvirtinome. Tai buvo labai laiku, nes po kelių mėnesių kilo 2009 m. gripo pandemija ir mes buvome pasirengę.
Ar yra vertinga Yale specialistams atlikti šiuos specializuotus gripo testus?
Mūsų skubios pagalbos skyriuje priimdami naujus ligonius atliekame greitą komercinį gripo testą. Jei jis neigiamas, galime testavimą pakartoti atlikdami CDC testą. Jei atsiranda nauja viruso padermė, galime ją greičiau identifikuoti ir taip pat galėsime atnaujinti savo testą, remdamiesi CDC rekomendacijomis.
2009 metais žmonėms buvo svarbu žinoti, ar jie serga standartiniu sezoniniu gripu, ar yra užsikrėtę nauja pandemine atmaina, kadangi nauja padermė buvo rimtesnė – ypač vaikams ir jaunesniems suaugusiesiems. Ši nauja padermė nuo sezoninio gripo skyrėsi jautrumu antivirusinei terapijai ir jai vakcinos dar nebuvo.
Tai reiškė, kad mums buvo reikalingos sustiprintos apsaugos priemonės, įskaitant sveikatos priežiūros darbuotojų, kurie užsikrėtė nauja gripo atmaina, prašymus ilgiau nedirbti. Žinojimas su kuo susiduriamė yra labai naudingas paciento valdymo ir gydymo požiūriu.
Kaip 2019 m. gripo sezonas atrodo iki šiol?
2019 metais savo laboratorijoje diagnozavome tik kelis gripo atvejus per savaitę. Įprastais metais gripo aktyvumas iš esmės padidėja gruodžio viduryje ar pabaigoje.
Išversta ir parengta pagal 2019 lapkričio 14 dienos Yale University Medicine straipsnį:
http://ym2-live-prod.ysmdevs.com/news/flu-lab